產(chǎn)品簡(jiǎn)介

DAPI，也稱DAPI dihydrochloride，是一種常用的核酸染料，可以和雙鏈DNA富含AT序列的小溝結(jié)合，產(chǎn)生比自身強(qiáng)20多倍的藍(lán)色熒光。和EB(ethidium bromide)相比，DAPI對(duì)雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI也可對(duì)RNA進(jìn)行染色，染色機(jī)理是其可以選擇性嵌入“AU序列”并發(fā)出熒光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358 nm/461 nm)，DAPI-RNA具有較長(zhǎng)的最大發(fā)射波長(zhǎng)(500 nm)，其熒光亮度僅有DAPI-dsDNA的20%。

盡管DAPI不能通過活細(xì)胞膜，但可以通過提高濃度使之進(jìn)入活細(xì)胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用來檢測(cè)酵母線粒體DNA，葉綠體DNA，病毒DNA，Microplasm DNA以及染色體DNA。

DAPI典型的藍(lán)色熒光特性使其非常普遍的搭配其他綠色、黃色或紅色熒光染料用于細(xì)胞生物學(xué)多色熒光標(biāo)記技術(shù)，因此也常作為核酸和染色體的復(fù)染劑用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)、RNA原位雜交、直接或間接免疫檢測(cè)等領(lǐng)域，其染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

本產(chǎn)品為溶液，分為2種形式，濃度為5 mg/mL和即用型，即用型產(chǎn)品濃度已經(jīng)過優(yōu)化，確保可以滿足各種常規(guī)染色的需要。另外提供粉末形式的DAPI供客戶選購(gòu)。

產(chǎn)品性質(zhì)

 中文名稱（Chinese Synonym） 4’,6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚二鹽酸鹽

英文名稱（English Synonym）4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride

CAS號(hào)（CAS NO.）  28718-90-3

分子式（Molecular Fomular）  C16H17Cl2N5·2HCl

分子量（Molecular Weight）350.25

熒光光譜（Fluorescence Spectral）

DAPI的Ex/Em=340 nm/488 nm; DAPI-DNA的Ex/Em=358 nm/461 nm

使用方法

1）取適量1mM DAPI水溶液加到PBS* 中，制備成10-50 μM的DAPI溶液。

* 推薦以下PBS的配制方法：NaCl: 8.00g KCl: 0.20g Na2HPO4 .12H2O: 2.9g KH2PO4: 0.2g 以上試劑溶解于1000 ml純水中。

（2）將1/10培養(yǎng)基體積的DAPI溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中。（也可以用1/10濃度的DAPI緩沖液代替培養(yǎng)基。）

（3）在37℃培養(yǎng)細(xì)胞10-20分鐘。

（4）用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。

（5）用帶有360 nm激發(fā)波長(zhǎng)，460 nm發(fā)射波長(zhǎng)的濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。

運(yùn)輸與保存方法

 冰袋運(yùn)輸，5 mg/mL的DAPI儲(chǔ)存液于-20oC避光保存，1年有效。即用型的DAPI 染液于4℃避光保存，有效期6個(gè)月。

注意事項(xiàng)

1）DAPI對(duì)人體有一定刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

2）熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。

3）為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4）低濃度的DAPI不容易穿透細(xì)胞膜。

5）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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