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Wheat Germ Agglutinin (WGA), Rhodamine羅丹明標記小麥胚凝集素

貨號 R1022-5mg 售價(元) 4380
規(guī)格 5mg CAS號
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Wheat Germ Agglutinin (WGA), Rhodamine羅丹明標記小麥胚凝集素

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產品簡介

?麥胚凝集素(Wheat Germ Agglutinin,WGA)是廣泛應用于細胞生物學的凝集素之一。WGA識別的糖類受體是N-乙酰葡糖胺(GlcNAc),傾向與N-乙酰葡糖胺的二聚體和三聚體結合。WGA能結合含N-乙酰葡糖胺末端或殼二糖的寡糖,這類結構在許多血清和膜來源糖蛋白中普遍存在。細菌細胞壁肽聚糖、甲殼素(幾丁質)、軟骨糖胺聚糖和糖脂也能結合WGA。天然WGA還能通過N-乙酰神經氨酸(唾液酸)殘基與一些糖蛋白相互作用。WGA適用于胰島素受體的純化、血清蛋白和神經示蹤。

麥胚凝集素(Wheat Germ Agglutinin,WGA)通常用來標記糖蛋白,用于活細胞或固定細胞的質膜成像,用于組織切片染色或其它標準的免疫分析實驗。WGA能用作一種革蘭氏染色劑,熒光標記革蘭氏陽性菌(非革蘭氏陰性菌)。還能用于結合出芽酵母(比如釀酒酵母)的出芽痕。

本品是羅丹明標記的麥胚凝集素(Rhodamine labeled Wheat Germ Agglutinin, Rhodamine-WGA),Ex/Em= 550/575nm,親和純化所得,基本不含未標記的熒光素。建議工作濃度范圍是5-20μg/ml。

產品性質

?英文同義名:Wheat Germ Agglutinin, Rhodamine Conjugate; Rhodamine labeled Wheat Germ Agglutinin; Wheat germ agglutinin lectin, Rhodamine Conjugate; Rhodamine labeled WGA Lectin;

中文同義名:麥胚凝集素,羅丹明標記;羅丹明標記的麥胚凝集素;羅丹明標記的小麥胚芽凝集素;

糖類特異性:N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)

外觀:溶液(溶于10 mM HEPES, 0.15 M NaCl, pH 7.5, containing 0.1 mM Ca2+, 0.08% sodium azide, 25mM N-acetylglucosamine)

蛋白濃度:5mg/ml

Ex/Em:495/515nm

抑制和/或洗脫糖類:400mM N-乙酰葡糖胺

應用:IF、糖生物學

保存:2-8℃避光保存,至少1年有效。

運輸:冰袋運輸。

質膜標記操作流程:

一、標記活的真核細胞

以下是對貼壁培養(yǎng)在蓋玻片上的活細胞的通用染色步驟。以下步驟使用HBSS溶液對哺乳動物細胞進行優(yōu)化染色。根據不同的模型系統(tǒng)和預期效果來優(yōu)化染色時間和濃度。

1.1 制備染色工作液:用HBSS(無酚紅)稀釋羅丹明-WGA(5mg/ml)到工作濃度,常用工作濃度范圍為5-20μg/ml。使用細胞培養(yǎng)基稀釋WGA偶聯(lián)物用于標記可能導致增高的非細胞染色背景。

1.2 細胞標記:加入足量的染色工作液完全覆蓋蓋玻片上的細胞。37℃孵育10min。

1.3 細胞清洗:標記結束后,吸走染色工作液,用合適的緩沖液清洗細胞2次。除非細胞要做固定,此時即可在預熱的HBSS或其它適合于成像的緩沖液中封片。

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1.4 【可選】細胞固定:可能用4%多聚甲醛固定染色好的細胞,37℃ 15min,之后用緩沖液清洗,以及做另一種復染。如有必要用0.2% Triton X-100透化細胞。

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二、標記固定的真核細胞

以下是對貼壁培養(yǎng)、甲醛固定且未做透化處理細胞的通用染色步驟。根據不同的模型系統(tǒng)和預期效果來優(yōu)化染色時間和濃度。

2.1細胞固定

2.2 細胞清洗:

2.3 準備染色工作液

2.4 細胞標記

2.5 細胞清洗

2.6 細胞成像

注意事項

本品置于2-8℃長期保存可能會產生沉淀,使用前請37℃溫育數分鐘,之后離心吸取上清使用。此操作基本不會對產生性能造成負影響。

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


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