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乳酸含量(LA)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)

貨號 SH0251 售價(元) 816
規(guī)格 50T/24S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0251

乳酸含量(LA)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)

50管/24樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產(chǎn)物,與糖代謝、脂類代謝、蛋白質(zhì)代謝及細胞內(nèi)能量代謝密切相關(guān),乳酸含量是評估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標。

測定原理:

乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸,同時使NAD+還原生成NADHH+,H+傳遞給PMS生成的PMSH2還原INT生成紅色物質(zhì),在530nm處有特征吸收峰。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0251-50T/24S

Storage

提取液:液體

55ml

4℃

試劑一:液體

5ml

4℃

試劑二:液體

12ml

4℃

試劑三:粉劑

1

-20℃避光

試劑四:粉劑

1

4℃避光

試劑五:粉劑

1

4℃避光

標準品:液體

1ml

4℃

說明書

一份

 

試劑三:粉劑×1支,-20℃避光保存。臨用前加入1.5ml蒸餾水充分溶解。

試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加15ml蒸餾水充分溶解。

顯色液:臨用前根據(jù)用量按照提取液(V):試劑三(V):試劑四(V):試劑五(m=1ml)0.3ml)3ml)15mg)的比例充分混勻。(注意:現(xiàn)配現(xiàn)用,用多少配多少,在棕色瓶中配制,試劑盒中帶有5個棕色空瓶)

自備儀器和用品:

天平、研缽、離心機、可見分光光度計、1 ml玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

樣本處理:

1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1ml提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,12000g離心10min,取上清測定。

2. 細胞:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);于4℃,12000g離心10min,取上清測定。

3. 血清:直接測定。              

測定操作:

 

樣品對照管

樣品測定管

標準對照管

標準測定管

樣品(μl

50

50

 

 

標準品(μl

 

 

50

50

  H2Oμl  

300

450

300

450

試劑一(μl

150

 

150

 

試劑二(μl

200

200

200

200

顯色液(μl

300

300

300

300

充分混勻,于37℃反應30min,于1ml玻璃比色皿,蒸餾水調(diào)零,測定530nm處吸光值,分別記為A1,A2,A3,A4,A=A2-A1;A= A4-A3

注意:標準對照管和標準測定管只需測定一次,每個樣品測定管設(shè)一個樣品對照管

計算公式:

1. 按照蛋白含量計算

LA含量(μmol/mg prot=△A÷△A×C÷ Cpr

                    =2×△A÷△A÷ Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計算

LA含量(μmol/g 鮮重)=△A÷△A×C÷ W

                    =2×△A÷△A÷ W

3. 按照細胞數(shù)量計算

LA含量(μmol/104 cell=△A÷△A×C÷ 細胞數(shù)量

                    =2×△A÷△A÷ 細胞數(shù)量

4. 按照液體體積計算

LA含量(μmol/ml=△A÷△A×C

                    =2×△A÷△A

C標:標準品濃度,2mmol/L ;W:樣本質(zhì)量,g/ml;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml

注意事項:

1. 若吸光值超過2,請進行適當?shù)南♂尯笤龠M行測定,并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

2. 最低檢出限為1.8μmol/L。

 

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